选择高效液相色谱分离方法
发布时间:2012-12-16 点击次数:4596
三、分离系统 液相色谱柱一般采用不锈钢材质,耐高压。长10~50犮犿,直
径4~5犿犿,直形以减小阻力。当填料粒度为5~10μ犿时,柱效
可达5000~10000块?犿理论塔板数。
填充色谱柱的方法,有干法和湿法。当填充粒的微粒大于
20μ犿时用干法,边填充边敲打和震动。填充10μ犿以下的微粒,
先将填粒制成悬浮液,用高压泵打入。 四、检测系统
液相色谱检测器需要检测的对象是液体,可分为两类:只对被
分离组分的物理或物理化学性质有响应,如紫外检测器(犝犞犇)、
二极管阵列检测器(犘犇犃犇)、荧光检测器(犉犇)、电化学检测器,称
溶质性检测器;对样品和洗脱液总的物理或物理化学性质有响应,
如示差折光检测器(犚犚犇)、电导检测器(犈犆犇)称总体检测器。性
能指标如表15-1所示。犘犇犃犇是20世纪80年代发展起来的新 表15-1
型紫外吸收检测器,它与犝犞犇的区别在于进入流通池的不再是
单色光,获得的检测信号不是在单一波长上,而是全部紫外光波长
上的色谱信号。因此它不仅可进行定量检测,还可提供组分的光
谱定性信息。 图15-5 选择高效液相色谱分离方法参考图
犔犛犆—液-固色谱法;犖犘-犅犘犆—正相键合相色谱法;犚犘-犅犘犆—反相键
合相色谱法;犌犘犆—凝胶渗透色谱法;犌犉犆—凝胶过滤色谱法;犐犘犆—离子
对色谱法;犐犆—离子色谱法 五、数据处理系统
现代液相色谱仪均配有色谱工作站,它具有下列功能:(犻)自
行诊断;(犻)全部操作参数控制;(犻)智能化数据和谱图处理;(犻狏)
进行计量认证(判定是否符合计量认证标准);(狏)控制多台仪器;
(狏犻)网络运行。可以预料,随计算机技术的发展,工作站的功能将 更加丰富和完善。
六、方法选择
在充分考虑分析样品的溶解度、分子量、分子结构和极性差异
的基础上,确定高效液相色谱分离方法。图15-5可作为方法选择时的参考。