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毛细管凝胶电泳
发布时间:2012-12-16   点击次数:4541

3. 毛细管凝胶电泳(犌犲犾犆犪狆犻犾犪狉狔犈犾犲犮狋狉狅
狆犺狅狉犲狊犻狊,简称犌犆犈)是毛细管内填充凝胶或其他筛分介质,如交联
或非交联的聚丙烯酰胺。荷质比相等,但分子的大小不同的分子,
在电场力的推动下在凝胶聚合物构成的网状介质中电泳,其运动
受到网状结构的阻碍。大小不同的分子经过网状结构时受阻力不
同,大分子受到的阻力大,在毛细管中迁移的速度慢;小分子受到
的阻力小,在毛细管中迁移的速度快,从而使它们得以分离。
4.毛细管等电聚焦 等电聚焦(犐狊狅犲犾犲犮狋狉犻犮犉狅犮狌狊犻狀犵,简称
犐犈犉)是一种根据等电点的差别分离生物大分子的电泳技术。等
电聚焦电泳在毛细管中行进,就是毛细管等电聚焦(犆犪狆犻犾犪狉狔犐狊狅
犲犾犲犮狋狉犻犮犉狅犮狌狊犻狀犵,简称犆犐犈犉)。两性物质以电中性状态存在时的
狆犎叫等电点,用狆犐表示。如氨基酸、蛋白质、多肽等在其等电点
时为电中性,淌度为零,溶解度最小。当所处环境的狆犎大于其等
电点时,两性物质以带负电形式存在;当所处环境的狆犎小于其等
电点时,两性物质以带正电形式存在。利用两性物质在等电点时
呈电中性、淌度等于零的特性,建立了等电聚焦电泳。
所谓“聚焦”是当两性物质在毛细管中形成狆犎梯度时,不同等
电点的溶质在外电场的作用下,分别向其等电点的狆犎范围迁移,此
过程叫聚焦。当溶质迁移到等于其等电点的狆犎范围时,就不再移
动,形成一个很窄的溶质带。由于不同两性物质的等电点不同,聚
焦的狆犎范围不同,可以形成一个个独立的溶质带而彼此分开。
5.毛细管等速电泳 毛细管等速电泳(犆犪狆犻犾犪狉狔犐狊狅狋犪犮犺狅
狆犺狉犲狊犻狊,简称犆犐犜犘)用两种淌度差别大的缓冲体系分别构成前导
离子和尾随离子,将样品像夹心饼干一样夹在二者之间,在一次电 泳中可以同时分离正离子或负离子。
前导电解质用淌度大于样品中所有负离子的电解质组成,尾
随离子由淌度小于样品中所有负离子的电解质组成。所有溶质都
按前导离子的速度等速前移。由阴极进样,在阳极检测。当加电压后,所有负离子都向阳极迁移。因前导离子淌度最大,迁移最快,走在最前,其后是淌度次之的负离子,他们都以前导离子的速度迁移,并逐渐形成独立的溶质区带而得到分离。